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目前ELISA試劑盒檢查的樣本中,除了細胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。關于ELISA試劑盒客戶來說,在試驗中可能用到不一樣的樣本,怎么區(qū)分所購的ELISA試劑盒能否測手中的樣本呢?關于zui常見的細胞上清,我們我們知道,培育細胞進程中,無格外狀況通常是10%的牛血清參加培育基中,通過培育后,細胞的吸收耗費,zui終細胞上清中蛋白含量會很少,并且關于通常牛血清出產(chǎn)的廠家來說,在出產(chǎn)進程中現(xiàn)已去除了,所以對通常ELISA而言,不會影響抗體抗原的結(jié)合。
1、如ELISA試劑盒廠家沒有供給專門用于血清血漿樣本的緩沖液,那么只要用已知濃度的待測目標蛋白參加所測種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測目標蛋白參加PBS緩沖液中一起檢查比照,ELISA試劑盒即可知道該試劑盒是不是可以直接用來測血清血漿樣本。
2、如廠家沒有供給專門用于血清血漿樣本的緩沖液,只是有一個抽象的或一致的稀釋液,那么只要用已知濃度的待測目標蛋白參加所測種屬的血清直接加樣和用已知濃度的待測目標蛋白參加廠家供給的一致的緩沖液中一起檢查,也可得出該試劑盒是不是可直接用來檢查血清血漿樣本。
3、如廠家供給專門用于血清血漿樣本的緩沖液,可用已知濃度的待測目標蛋白參加所測種屬的血清直接加樣和用緩沖液按說明書分別加樣,也可得出成果。
如該種類型ELISA試劑盒樣本總量如為100μl的話,通常而言,會是50μl的樣本加樣量和50μl的特定的緩沖液。
在運用ELISA試劑盒的進程,可將已知濃度的蛋白用血清或血漿調(diào)配到試劑盒標定的檢查限的zui高值的2倍,參加50μl做兩孔,一孔補入慣例的50μl規(guī)范品稀釋液,ELISA試劑盒一孔補入50μl樣本剖析緩沖液,即可區(qū)分出作用來,有時候,有些廠家為了到達“消除”的作用,在樣本剖析緩沖液中參加待測目標蛋白,為了鑒別出這種狀況,也可直接參加樣本剖析緩沖液做一孔,一起做比照,這么可試出試劑盒中的對于血清血漿樣本的緩沖液是不是真的有用。