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    合適ELISA試劑盒檢測(cè)樣本的辦法

    發(fā)布時(shí)間: 2017-11-16  點(diǎn)擊次數(shù): 1185次

    血清是zui常用的ELISA試劑盒標(biāo)本之一,ELISA檢測(cè)中血漿一般可視為與血清平等的標(biāo)本,標(biāo)本中煩擾性物質(zhì)是引起檢測(cè)后作用偏高或偏低的主要原因,煩擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類;
    外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA測(cè)定的血標(biāo)本的搜集、貯存等不當(dāng)所構(gòu)成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過(guò)久、標(biāo)本凝集 不全和采血管中添加物等影響。
    由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞損壞溶解時(shí)釋放出許多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的 ELISA測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,煩擾測(cè)定作用。
    標(biāo)本受細(xì)菌污染 :因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可發(fā)生非特異性顯色而煩擾測(cè)定作用。
    ELISA試劑盒標(biāo)本保存不當(dāng) :在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本,血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至構(gòu)成檢測(cè)OD值偏高;
    標(biāo)本凝集不全;在ELISA檢測(cè)中影響血清血漿樣本的要素許多,在考慮試劑要素和操作要素之外,也應(yīng)從標(biāo)本要素方面進(jìn)行分析。
    常見的煩擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
    類風(fēng)濕因子 :血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)在ELISA檢測(cè)中,可與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶符號(hào)二抗的FC段直接結(jié)合,然后導(dǎo)致檢測(cè)OD值偏高。
    補(bǔ)體 : ELISA系統(tǒng)中固相一抗和符號(hào)二抗過(guò)程中,抗體分子發(fā)生變構(gòu),其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點(diǎn)被露出出來(lái),使C1q 可以將二者連接起來(lái),然后構(gòu)成檢測(cè)OD值偏高。
    嗜異性抗體;人類血清中含有能與嚙齒類動(dòng)物(如鼠等)Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來(lái),也能構(gòu)成檢測(cè)OD值偏高。
    ELISA試劑盒此外血清中嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過(guò)高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過(guò)大等,均對(duì)ELISA測(cè)定作用有煩擾作用。

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